Test se koristi za određivanje koncentracije eritropoetina u krvi. Koristi se za diferencijalnu dijagnozu eritrocitoze i procenu stepena anemije. U terminalnom stadijumu bubrežnih bolesti određivanje eritropoetina služi za procenu potrebe za započinjanjem terapije rekombinantnim humanim eritropoetinom (supstituciona terapija).
Uzorak seruma ili plazme
Pre centrifugiranja ugrušak mora da bude u potpunosti formiran. Uzorke je potrebno centrifugirati što je pre moguće, a najkasnije u roku od dva sata od vremena uzimanja.
Eritropoetin se određuje kada se posumnja na nedostatak ovog hormona, zajedno sa ostalim testovima uz kliničku sliku za postavljanje dijagnoze primarne ili sekundarne policitemije, kao i za praćenje terapijskog efekta.
Eritropoetin pokazuje cirkadijalni ritam i vrednosti ovog parametra su za 40% veće uveče nego ujutru. Noćno gladovanje pre vađenja krvi nije obavezno, ali se krv mora uzorkovati ujutru.Kod serijskog testiranja eritropoetina uzorkovanje krvi vršiti uvek u isto vreme.
Početkom dvadesetog veka Paul Carnot je primetio da u eksperimentima kod anemičnih životinja postoji cirkulišući faktor u krvi, koji povećava broj eritrocita i nazvao ga hematopoetin. Sredinom dvadesetog veka naučnici su objasnili poreklo i fiziološku funkciju hormona koji stimuliše eritropoezu i nazvali ga eritropoetin.
1977. godine je dobijen prečišćen eritropoetin iz urina ljudi, a 1985. godine je otkriven gen za sintezu eritropoetina.
Eritropoetin je glikoproteinski hormon koji se sastoji od 165 aminokiselina i ima 4 složena lanca ugljenih hidrata koji su povezani sa peptidima na 4 mesta vezivanja.
EPO je najznačajniji faktor eritropoeze koji podstiče razmnožavanje i diferencijaciju eritroidnih prekursorskih ćelija u koštanoj srži. Nedostatak EPO u organizmu čoveka dovodi do teške anemije
Glavno mesto sinteze je u bubrezima - preko 90%, dok se u jetri sintetiše ispod 10%. Eliminacija EPO iz krvotoka prevashodno se postiže tako što ga preuzimaju ciljne ćelije u koštanoj srži, tj. EPO se veže za receptorska mesta na površini eritroidnih prekursorskih ćelija i stimuliše njihovu proliferaciju i sazrevanje, kao i oslobađanje retikulocita u cirkulaciju. EPO stimuliše i sintezu intracelularnog hemoglobina. Kod zdrave populacije, ukoliko su prisutni svi neophodni nutritivni faktori (naročito gvožđe), odgovor na EPO je brz i dolazi do sazrevanja eritrocita. Kod anemija i hipoksije koncentracija EPO u krvi može da se uveća i do 1000 puta.
EPO reguliše proizvodnju crvenih krvnih zrnaca u zavisnosti od toga koliko je kiseonika potrebno tkivima. On ispoljava svoje dejstvo putem mehanizma povratne sprege, pri kojem lučenje ovog hormona u bubrezima regulišu faktori transkripcije koji indukuju hipoksiju (HIF). Nizak pritisak kiseonika tokom hipoksije izaziva povećanje koncentracije HIF faktora, a to podstiče proizvodnju EPO. U uslovima povećane vrednosti perifernog kiseonika dolazi do brze razgradnje α podjedinica HIF faktora i smanjenja koncentracije EPO.
U odnosu na koncentraciju EPO u krvi anemije se mogu podeliti u 2 kategorije: primarne i sekundarne.
Nemogućnost da se proizvede dovoljno EPO uzrokuje anemije umerenog do teškog stepena kod oboljenja bubrega krajnjeg stadijuma. Smanjena proizvodnja EPO pripisuje se uništavanju mesta proizvodnje u bubrezima, odnosno gubitku peritubularnih fibroblasta unutar bubrežnog korteksa. Koncentracije hormona su malo više od referentnih vrednosti i nisu dovoljne da nadoknade gubitak krvi uzrokovan dijalizom, skraćenim životnim vekom crvenih krvnih zrnaca, nedostatkom gvožđa i folata, smanjenim prenošenjem gvožđa do eritroidnih progenitorskih ćelija i drugim problemima koji se javljaju kod takvih bolesnika. Kod pacijenata koji nemaju bubrege koncentracije EPO su izrazito niske.
S druge strane, kod manjeg broja pacijenata sa hroničnom bubrežnom insuficijencijom beleže se normalne vrednosti hematokrita ili anemija blažeg stepena i povišena koncentracija EPO.
Kod pacijenata sa virusnim hepatitisom povišena koncentracija EPO može biti uzrokovana povećanom proizvodnjom u jetri.
Prekomerna proizvodnja crvenih krvnih zrnaca naziva se policitemija. Policitemije se takođe mogu podeliti u 2 kategorije u zavisnosti od toga da li koncentracija EPO ima primarnu ili sekundarnu ulogu u policitemiji.
Niska koncentracija EPO u serumu predstavlja dobar pokazatelj da se radi o PV, ali se dijagnoza ne može uspostaviti isključivo na osnovu nje. Koncentracija EPO u serumu može biti u referentnim granicama kod pacijenata sa PV. Postoje preporučeni pragovi niske i visoke koncentracije EPO u serumu koji pomažu u dijagnostikovanju PV-a i sekundarne eritrocitoze. Pored toga, obavljanje samo jedne analize za određivanje koncentracije eritropoetina u serumu kod pojedinačnih pacijenata ima ograničenu dijagnostičku vrednost u razlikovanju primarne i sekundarne eritrocitoze.
Saznaj u roku od 4h šta to znači!
Koncentracije eritropoetina određene testovima različitih proizvođača mogu varirati zbog razlika u metodama i specifičnosti testova. Vrednosti eritropoetina je najbolje pratiti jednom metodom, tj. u jednoj laboratoriji. Rezultati ovog testa nisu apsolutni dokaz prisustva ili odsustva oboljenja. Rezultate testa će tumačiti lekar zajedno sa drugim dijagnostičkim testovima (hemoglobinom, hematokritom), kliničkom slikom pacijenta i istorijom bolesti, jer referentne vrednosti same za sebe nemaju klinički značaj.
Preporuka je da se ne koristi hemoliziran, lipemičan ili ikteričan uzorak.
Biološki činioci koji utiču na rezultat su: dnevni ritam, telesni napor, pušenje, trudnoća.
Lekovi koji utiču na rezultat su: acetazolamid, amfotericin B, cisplatin, enalapril, furosemid, teofilin.
Koncentraciju eritropoetina povećavaju: anabolici, ACTH, TSH, epinefrin i hormoni rasta.
Koncentraciju eritropoetina smanjuje transfuzija krvi.
Variranje koncentracije EPO tokom dana zabeleženo je kod osoba koje žive na visokim nadmorskim visinama, kao i kod pacijenata koji pate od apneje tokom spavanja ili kod bolesti pluća.
Uslovi koji utiču na količinu kiseonika, kao što su bolesti pluća i hronično pušenje, mogu da
izazovu povećanu proizvodnju EPO kako bi se nadoknadila snižena vrednost kiseonika.
Jelena Kotur Stevuljević, Dr sc., redovni profesor Farmaceutskog fakulteta u Beogradu
Rođena 1969. godine u Smederevu. Diplomirala, a kasnije odbranila magistarski i doktorski rad na Farmaceutskom fakultetu Univerziteta u Beogradu iz oblasti medicinske biohemije. Na Katedri za medicinsku biohemiju Farmaceutskog fakulteta je zaposlena od 1996, a od 2018. i kao redovni profesor. Dobitnik je brojnih stipendija i nagrada, a 2020. godine se našla na listi 2% najuticajnijih naučnika u svetu baziranoj na standardizovanoj metrici citiranja svih naučnika i naučnih disciplina koju je objavio Univerzitet Stanford. Centralna tema njenih istraživanja je razvoj analitike za kvantifikaciju oksidativnog stresa u biološkim tečnostima. Recezent svih tekstova na ovim stranicama.